水產(chǎn)品中喹乙醇檢測的固相萃取方法
（Polyclean X-MAX）
一、實驗目的
本研究利用固相萃取作為樣品前處理方法，HPLC 作為分析方法，檢測水產(chǎn)品樣品中的喹乙醇的殘留水平。該方法操作簡便，可簡化樣品前處理過程，減少有機溶劑的使用。
二、實驗目標物
喹乙醇（CAS: 23696-28-8）
三、應用范圍
本方法適用于水產(chǎn)品中喹乙醇的檢測的HPLC 檢測及確證。四、實驗材料
NuAnalytical PolyClean X-MAX 固相萃取柱 60mg/3mL。五、實驗方法
1、 樣品待測溶液制備
準確稱取 5 g 勻漿魚肉樣品(精確到 0.001 g)于 50 mL 離心管中，加入 35 mL 甲醇-水溶
液(5:95, v/v)，離心管置入搖床中，室溫下恒溫振蕩器振蕩速度 110 r/min，避光振蕩 45 min。
提取液在 3500 r/min 下離心 10 min，上清液經(jīng)濾紙過濾，濾液加入 10 mL 正己烷，充分混
勻后，以 5000 r/min 離心 10 min，棄去上層溶液，下層溶液待凈化。
2、活化
依次用 3 mL 甲醇和 3 mL 水活化
3、上樣和洗脫
將待凈化的樣品清液加入已活化好的固相萃取柱中，以 1 mL/min 的流速過柱，棄去濾液。用 3mL 甲醇-水溶液(5:95, v/v)淋洗固相萃取柱，棄去淋洗液，用吸耳球吹出小柱中殘留液。用 5 mL 甲酸-乙酸乙酯溶液(1:9, v/v)洗脫固相萃取柱，收集洗脫液。
4、重新溶解
洗脫液于 40 ℃氮氣吹干，用 2 mL 甲醇定容，0.22 μm 微孔濾膜過濾，供高效液相色譜測定。
5、HPLC 條件
色譜柱：SuperLu C18 (250×4.6mm, 5μm) 檢測器：UV@ 380 nm
流動相：A：甲醇 B：0.1%甲酸水溶液 洗脫方式：梯度洗脫，洗脫程序如下：
時間/min
A/%
B/%
0.00
15
85
3.00
15
85
7.00
70
30
12.00
70
30
16.00
15
85
20.00
15
85
流速：1.0 mL/min 柱溫：30 ℃ 進樣量：20 μL
六、實驗結(jié)果
1、魚肉中喹乙醇 2 mg/kg 添加回收結(jié)果
表 1 魚肉中喹乙醇 2 mg/kg 添加回收結(jié)果
|
名稱 |
1 |
2 |
3 |
平均回收率（%） |
RSD（%） |
|
喹乙醇 |
86.7 |
81.1 |
86.1 |
84.6 |
3.6 |
2、添加水平為 2 mg/kg 魚肉中喹乙醇檢測色譜圖
圖 1 添加水平為 2 mg/kg 魚肉中喹乙醇檢測色譜圖
